FISH è sinonimo di ibridazione in situ fluor fluorescente. Il test FISH o analisi FISH, come talvolta viene indicato, è una tecnica citogenetica relativamente nuova che consente al citogeneticista di determinare quante copie di un particolare cromosoma sono presenti senza dover passare attraverso tutti i passaggi coinvolti nella produzione di un cariotipo. Ad esempio, l’analisi FISH può dirvi rapidamente quanti cromosomi numero 21 sono presenti, ma non può dirvi nulla sulla struttura di quei cromosomi. Come funziona testing Il test FISH viene solitamente eseguito sugli stessi campioni di un cariotipo – sangue, amniociti o un campione di villi corionici. Un test FISH viene eseguito utilizzando una sonda fluorescente che si lega a determinati cromosomi specifici. Queste sonde fluorescenti sono fatte di DNA specifico per alcuni cromosomi e sono etichettate con un colorante fluorescente. Le cellule utilizzate nell’analisi FISH non devono essere coltivate o coltivate (che possono richiedere da 7 a 10 giorni), quindi i risultati di un’analisi FISH sono disponibili molto più velocemente dei risultati di un cariotipo.
In genere, un campione viene ottenuto e inviato al laboratorio e i cromosomi sono isolati su una diapositiva. Le sonde vengono quindi posizionate sulla diapositiva e lasciate ibridare (o trovare la loro corrispondenza) per circa 12 ore. Poiché le sonde sono fatte di DNA, si legheranno al DNA "corrispondente" del loro cromosoma specifico. Ad esempio, una sonda fatta di DNA specifico per il cromosoma 21 si legherà a qualsiasi cromosoma numero 21 presente.
Dopo l’ibridazione (o l’incollatura), la diapositiva viene esaminata sotto uno speciale microscopio che può vedere immagini fluorescenti. Contando il numero di segnali fluorescenti, un citogeneticista può determinare quanti cromosomi specifici sono presenti. Ad esempio, una persona senza sindrome di Down avrà due segnali fluorescenti corrispondenti ai loro due cromosomi numero 21.
Una persona con trisomia 21 avrà tre segnali fluorescenti corrispondenti ai loro tre cromosomi numero 21. Tipicamente, i citogenetici useranno le sonde per i cromosomi 13, 18, 21, X e Y. Questi sono i cromosomi che possono portare a trisomie per gli umani.
Diagnosi della sindrome di Down
Sebbene non analizzi la struttura attuale dei cromosomi analizzati, l’analisi FISH può dirvi quante copie di un particolare cromosoma sono presenti. Nella sindrome di Down, il citogeneticista utilizza le sonde per il cromosoma numero 21. Se ci sono tre segnali fluorescenti visti al microscopio, viene fatta la diagnosi di sindrome di Down.
In che modo i test FISH differiscono da un cariotipo?
L’analisi FISH ti dice solo che alcuni cromosomi sono presenti e quanti di essi sono presenti. Ad esempio, una tipica analisi FISH vi dirà quanti cromosomi 13, 18, 21, X e Y sono presenti in un campione di liquido amniotico. L’analisi FISH non ti darà informazioni su ogni cromosoma né ti darà informazioni sulla struttura attuale dei cromosomi.
Vantaggi
Il principale vantaggio dell’analisi FISH è che può fornire rapidamente informazioni su determinati cromosomi. Ad esempio, in tre o quattro giorni, può dire quante copie di un cromosoma numero 21 può avere una persona in particolare.
Al contrario, un cariotipo tradizionale può richiedere fino a due settimane.
Svantaggi
Il principale svantaggio dell’analisi FISH rispetto al cariotipo è che l’analisi FISH fornisce meno informazioni su tutti i cromosomi studiati. Ad esempio, un tipico test FISH prenatale ti dirà quanti cromosomi di numero 13, 18, 21, X e Y sono presenti (cioè se ci sono due copie o tre) ma non ti darà alcuna informazione su nessuno degli altri cromosomi o qualsiasi informazione sulla struttura attuale dei cromosomi.
Cosa chiedere al medico
Il laboratorio che si usa esegue il test FISH?
La mia assicurazione copre il costo dei test FISH?
- Quanto è affidabile il test FISH per la sindrome di Down?
- Quanto tempo ci vorrà per ottenere risultati FISH (dal mio amnio o CVS)?
- Il laboratorio esegue anche un cariotipo completo?
- Quanto tempo ci vuole per ottenere i risultati del cariotipo?
- Linea di fondo
- L’analisi FISH ha il vantaggio di fornire informazioni rapide, ma limitate, sui cromosomi di un feto. È molto bravo a rispondere alla domanda: "Il mio bambino ha la trisomia 21?" Ma fornisce informazioni limitate su altre anomalie cromosomiche strutturali come traslocazioni e delezioni.
